Перейти к публикации
Форум химиков на XuMuK.ru
A_drenalin_e

Вопрос по фосфатному буферу

Рекомендованные сообщения

Добрый день, помогите,пожалуйста, разобраться с составом буфера.

Для определения дегидрогеназной активности из биообъектов согласно методике используют специальный фосфатный буфер(для разбавления,ресуспендирования объекта) следующего состава:

2% растворе K2HPO4, содержащем 0,1% желатина и 0,2% MgCl 2

Вопрос -  Зачем к фосфатному буферу добавляют желатин и MgCl 2????

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение

Желатин - хорошо известный стабилизатор коллоидных систем. Магний?... А фиг его знает, может для получения микрокристаллов, или пит среда пролонгированного действия, или одновременно металло буфер.

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение

Если это среда для посевов - то желатин для бактерий, а не для буфера...

Нет,это буфер для фермента.  Грубо говоря, берут культуру бактерий, откручивают культуральную жидкость, ресуспендировают этим буфером, убивают бактерии, измеряют активность фермента ( внутренность бактерии,плавающие в этом буфере).

 

Вообще метода изначально писалась для измерения активности этого фермента (дегидрогеназы) из растительного сырья. Там получают экстракт из растения,добавляют буфер и меряют по методе активность.

 

Только вот зачем желатин с магнием туда впихнули хз

Желатин - хорошо известный стабилизатор коллоидных систем. Магний?... А фиг его знает, может для получения микрокристаллов, или пит среда пролонгированного действия, или одновременно металло буфер.

Зачем микрокристаллы ферменту????

По сути то получается

MgCl2 + K2HPO4 = MgHPO4 + 2 KCl

И тупо осадок

Зачем буферу осадок и желатин?(((((((((((((((((

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение

Так вроде в ходе определения активности дегидрогеназ наблюдают скорость обесцвечивания раствора,а в присутствии агара или желатина это происходит более наглядно,тк  время зафиксировать легко от начала и до конца реакции.

Магния хлорид-антикоагулянт.

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение

Защита от неспецифичного связывания если в плашке делается

а магний ,вероятно, необходим для работы этих дегидрогеназ

Изменено пользователем Bach

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение

Присоединяйтесь к обсуждению

Вы можете опубликовать сообщение сейчас, а зарегистрироваться позже. Если у вас есть аккаунт, войдите в него для написания от своего имени.
Примечание: вашему сообщению потребуется утверждение модератора, прежде чем оно станет доступным.

Гость
Ответить в тему...

×   Вставлено в виде отформатированного текста.   Вставить в виде обычного текста

  Разрешено не более 75 эмодзи.

×   Ваша ссылка была автоматически встроена.   Отобразить как ссылку

×   Ваш предыдущий контент был восстановлен.   Очистить редактор

×   Вы не можете вставить изображения напрямую. Загрузите или вставьте изображения по ссылке.

Загрузка...

  • Сейчас на странице   0 пользователей

    Нет пользователей, просматривающих эту страницу.

×
×
  • Создать...