Перейти к публикации
Форум химиков на XuMuK.ru
Kathrine

Проблема с разделением смеси сахаров с помощью ТСХ

Рекомендованные сообщения

Встала задача количественно определить содержание сахарозы, фруктозы и глюкозы с помощьью ТСХ. Методику решили выбрать, как предложено в этой ссылке http://www.pccf.ru/otabake/differencirovannyy-analiz-izmeneniy-v-strukturah-uglevodnogo-i-kislotnogo-kompleksov-tabachnogo (у меня приготовленные растворы этих сахаров с концентрацией 0,7 г/л и их смесь в равной пропорции). Применялись пластинки Silufol, такие же древние, как в этой статье, фосфорномолибденовая кислота тоже далеко не первой свежести, растворители достаточно свежие. 

В результате эксперимента мои пластинки голубеют полностью, пятна индивидуальных веществ едва заметны (чуть темнее), а смесь не разделяется в принципе: пятно не размазывается, а ползет на уровне сахарозы. С чем такой результат может быть связан?
Или может кто-то посоветует другую методику? Позже по задумке надо разработать методы разделения и количественного определения в смеси не только сахаров, но и органических кислот, которые могут присутствовать в экссудатах ростков сои (растут стерильно на солевом составе, который и будет анализироваться). В литературе много упоминаний о том, что наличие неорганических солей может мешать разделению смеси сахаров, но на практике это утверждение еще не успела проверить.

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение

Пластинки голубеют полностью, потому что Вы их передерживаете при нагреве. Когда греешь в сушильном шкафу, нужно их вовремя вынуть, чтобы и пятна были видны, и пластинка не посинела полностью. Выложите фотки пластинок. В принципе лучше использовать УФ пластинки для ТСХ, тогда можно спокойно обойтись без фосфорномолибденовой кислоты и нагрева. Сахара будут гасить люминисценцию и будут видны в виде черных пятен. На табаке получалось качественное определение. Другая методика - это ВЭЖХ с колонками для сахаров и соответствующим детектором (УФ не пойдет). 

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение

Пластинки голубеют полностью, потому что Вы их передерживаете при нагреве. Когда греешь в сушильном шкафу, нужно их вовремя вынуть, чтобы и пятна были видны, и пластинка не посинела полностью. Выложите фотки пластинок. В принципе лучше использовать УФ пластинки для ТСХ, тогда можно спокойно обойтись без фосфорномолибденовой кислоты и нагрева. Сахара будут гасить люминисценцию и будут видны в виде черных пятен. На табаке получалось качественное определение. Другая методика - это ВЭЖХ с колонками для сахаров и соответствующим детектором (УФ не пойдет). 

Спасибо за пояснение

026c37057f1e.jpg

 А если на этих пластинках использовать другой проявитель, чтобы их можно было посмотреть в УФ? Колонок у нас нет,только такие пластины...

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение

Выбор проявителя та еще история! Серку нельзя, т.к. растворит пластинки. Нужно что-то, что реагирует с альдегидной группой сахаров с образованием окрашенных соединений. Разрешение на Ваших пластинах очень плохое. Может воды нахватали из воздуха? Наши хранились в запечатанных пакетах. Попробуйте предварительно прогреть пластины при 120 градусах, может поможет.

Поделиться сообщением


Ссылка на сообщение

Присоединяйтесь к обсуждению

Вы можете опубликовать сообщение сейчас, а зарегистрироваться позже. Если у вас есть аккаунт, войдите в него для написания от своего имени.
Примечание: вашему сообщению потребуется утверждение модератора, прежде чем оно станет доступным.

Гость
Ответить в тему...

×   Вставлено в виде отформатированного текста.   Вставить в виде обычного текста

  Разрешено не более 75 эмодзи.

×   Ваша ссылка была автоматически встроена.   Отобразить как ссылку

×   Ваш предыдущий контент был восстановлен.   Очистить редактор

×   Вы не можете вставить изображения напрямую. Загрузите или вставьте изображения по ссылке.

Загрузка...

  • Сейчас на странице   0 пользователей

    Нет пользователей, просматривающих эту страницу.

×
×
  • Создать...