Разделение белков в хроматографической колонке

[msjulianovna]

Здравствуйте! Будьте добры, помогите, пожалуйста, с заданием и с моим возникшим противоречием.

 

1) Определить, какой белок будет адсорбироваться при пропускании через колонку с катионитом ацетатного буфера (pH=3,72), содержащего белки:

1) пепсин (pI=2,0);

2) казеин (pI=4,6).

 

Я рассуждала так: если в колонке катионит, значит, он должен адсорбировать катионы, то есть сам заряжен отрицательно (протон диссоциирует). Тогда получается, что он должен взаимодействовать с положительно заряженными белками. А таковыми будут те, что являются более щелочными, то есть менее кислыми - казеин (pI=4,6).

 

Скажите, пожалуйста, правильно ли так выполнить задание? Просто не очень понимаю,какой смысл в буферном растворе и что представляет собой весь этот механизм разделения веществ.

 

2) И еще одно противоречие, касаемо хроматографии. С одной стороны, при бумажной (как пример) хроматографии вещества более полярные должны связываться с этой твердой фазой и медленнее передвигаться по хроматографической бумаге. Но с другой стороны, согласно правилу Дюкло-Траубе, вещества с более длинным углеводородным радикалом будут лучше адсорбироваться. И каким тогда образом определить (по отношению к аминокислотам, например) какая из них будет медленнее выходить - та,у которой больше полярных групп или та, у которой меньше углеводородный скелет?

 

Помогите, пожалуйста!

 

Прошу Вас, помогите, пожалуйста!