Нужно провести фотометрию глюкозы. Стоит заметить, что перед этим я провёл йодиметрическое титрование (пять проб), которое показало содержание глюкозы 99% в навеске.
В лаборатории имеется спектрофотометр, с этим проблем нет. Выбирал из антрона (в лаборатории он кончился :( ), пикриновой кислоты, карбазола и фенола и на первый раз решил выбрать фенол. И тут что-то пошло не так.
Сначала я сделал навеску своей глюкозы 0,025 г и навеску стандартной глюкозы 0,025 г. Растворил в 10 мл воды каждую и взял аликвоты 2 мл. Аликвоты установил на ледяную баню. К этим 2 мл добавил по 50 мкл фенольного раствора, приготовленного как 5,417 г фенола в 6 мл этанола. К полученной перемешанной смеси я добавил 5 мл заранее охлаждённой концентрированной серной кислоты, чтобы сахар не обуглился (до этого я пытался провести опыт без ледяной бани — получил концентрированно чёрную смесь). Все объёмы брались дозаторами.
Перемешанным растворам я дал отстояться полчаса и отнёс на спектрофотометр. Оптимальная длина волны в районе 600 нм (спектрофотометр установил 488 нм). Обнулил по смеси 2 мл воды с 50 мкл фенола и 5 мл серной кислоты, которая готовилась параллельно основным реакционным смесям исследуемого образца и стандарта. Однако результаты показали, что абсорбция света стандартом вдвое больше, чем образцом, который должен быть по крайней мере в районе 99%. Так что не так?
Мне кажется, что проблема может быть в приготовлении фенола. Либо я его неправильно растворяю, либо я его беру мало, либо ещё что-то.