Перейти к содержанию
Форум химиков на XuMuK.ru

Angry_Biotechnologist

Пользователи
  • Постов

    250
  • Зарегистрирован

  • Посещение

Весь контент Angry_Biotechnologist

  1. Я летом тоже чучуть хапнул NO, кашлял сильно целый день, но ничего, потом отпустило. Хотя правда потом пару месяцев были приступы кашля внезапные. Сейчас вроде норм. Но с такими вещами смотреть надо, абы чего не случилось. Если через час действительно все будет ок - тогда возможно и пронесло.
  2. Еее дядь. Бегом в больничку. Кровью кашляет и на форумах пишет. Если с больнички выпишут - значит жить будеш.
  3. В чистой воде не получится - продукты метаболизма бактерий будут. Плюс абсолютно все съесть они тоже не смогут, они перейдут в фазу плато раньше.
  4. Тут один был что "партизанскую пушку" делал, вам бы с ним колаб сделать с такими проповедями
  5. Если были заморожены в -70 меньше то можно и скорее всего будет все ок. Но если не получится то причина будет ясна.
  6. сахарозу наверное, to play safe как говорится. Но тоже смотрите по ситуации, может не подойти - тогда глицерин. Если и глицерин не пойдет то можно что-то специфическое посмотреть. С гуанидином внимание - сильный хаотроп
  7. Если есть секвенция то сделайте 3д моделинг, можна будет глянуть на структуру и потенциально выяснить где что ламается https://www.ncbi.nlm.nih.gov/guide/howto/view-3d-struct-prot/ или https://swissmodel.expasy.org/interactive (рекомедую). Добавте еще параметры в которых у вас проходит експресия (кислотность, температура и растворитель), возможно проблема с ними. Вообще опишите что вы делали с ензимом, с чего изолировали как ставили в библиотеку/клонировали и т.п. Сложный воопрос - мало информации
  8. тогда мягкий детергент с стабилизатором Напишите потом как прошло - успешно или нет
  9. Можно больше информации? Какой белок, из каких бактерий, какие субединицы? Пока что выглядит так что у вас завелась некая структурная мутация (если нативный белок держался вместе, а теперь вдруг перестал) или же плохой выбор буфра
  10. Это мембранный белок как я понимаю? Для них можна использовать ещё такой тег https://cube-biotech.com/what-is-rho1d4-an-affinity-tag-specialized-for-membrane-proteins Надо дать какие-то нейонные детергенты (типа tween или октил глюкозид, можно даже мягче DM, DDM, L-MNG, GDN - что-бы выхлоп функционального белка был выше) + стабилизирующий агент (сахароза или глицерин). Вот интересная публикация на тему: https://www.researchgate.net/publication/264049754_Expression_solubilisation_and_purification_of_a_functional_CMP-sialic_acid_transporter_in_Pichia_pastoris Какой именно детергент - тут уже сами смотрите, так как каждый белок ведет себя чучуть по разному в разных детергентах.
  11. Так у вас должен быть тег полигистидиновый - он цепляется за метал (в вашем случае - никель). Тут два видео - первое, работа в практике, второе - теория.
  12. ну да, а что удивительного то? Ходил себе лев, умер. Потом пришел другой через 15к лет - тоже умер. И вот тебе два трупа в морозилке. Возьми проведи експеремент - кусок мяса положи в морозилку, заморозь на 1-2 года, потом положи еще один кусок и тоже его заморозь на пару месяцов - потом разморозь и посмотри если есть разница 😆
  13. Добрый день, Вам нужен HIC https://www.bio-rad.com/en-cz/applications-technologies/introduction-hydrophobic-interaction-chromatography-hic?ID=MWHB53MNI
  14. Приветствую! Если правильно понял воопрос: https://www.jstor.org/stable/2362985?seq=1#metadata_info_tab_contents https://www.researchgate.net/post/Can-anyone-help-me-with-problem-with-kinase-expression-in-BL21 https://www.google.com/search?q=protein+kinase+from+e+coli+bl21&rlz=1C1GCEU_csCZ970CZ970&oq=protein+kinase+from+e+coli+bl21&aqs=chrome..69i57.2058j0j7&sourceid=chrome&ie=UTF-8
  15. Скорее всего нитраты попали в колодец после удобрения местных полей
  16. Тема очень популярна по заграницах уже так с десяток лет минимум.
  17. Тема не туда поставлена, но я попробую ответить А - реакция идет, значит реагент приготовлен нормально Б - Очень возможно что выбраный лиганд просто заблокировал активный центр из-за чего правильный белок был изолирован, но он неактивный. С - нет, мы же нашли фракцию белка Д - возможно... наверное? Аффинная хроматография должна вытягивать именно интересующюю фракцию, этот метод имеет высокую специфичность, он не должен давать осечек (разве что сама колона была неправильно приготовлена). Посему скорее всего нет Остается вариант Б - некий лиганд просто прицепился к активному центру и прeвратился в ингибитора (non competitive inhibitor)
  18. К сожалению я не знаю, помочь тут не смогу. В идеале проконсультируйтесь с специалистом. Нормальный биотехнолог для вас может посчитать время фильтрации, проток, тип фильтров и т.п. Плюс этот человек должен знать местные точки збыта техники и её типы (как минимум в Европах это все изучают прям в универе). Потратите екстра денежку, но будет професионально сделаная система с высоким КПД.
  19. Добрый день Подскажите параметры фильтрации? Размер пор, какой процес (постоянный/непостоянный), что собствено вы фильтруете (продукт)? Пока что ясно что проблема в явлении которое за бугром называется fouling (см фотку) - поры фильтра закрываются слоем материала. Решается в зависимости от вида процеса на производстве. Нп для нутч-фильтра можна дать лопасти для перемешивания. Создание правильной турбулентности будет поднимать фракцию над фильтром. Какие лопасти и какая мощность перемешивания зависит от параметров пульпы и от параметров фильтрационого апарата пэр се. Квалифицированый биотехнолог вам все посчитает и подскажет что будет лучше именно вам.
  20. Солей много какой был воопрос такой был и ответ Вариант №1 - очень опасный Сначала приготовте царскую водку (75% + 25%) из чистых реагентов далей маленькими порциями добавляете золото (пропорция золото:к-та 1:5) при необходимости нагрей р-р до 85С (не больше!) нагревай аж все испарится до состояния "сиропа" - это хлорид золота Остудить и получить кристалы. Добавить чучуть воды что-бы растворить хлорид приготовь 30мл амиака в 100мл воды. Добавляй р-р амиака пока кислотность не выйдет 8 Получится осадок - это фульминат золота (гремучее золото). Не дай Бог ему высохнуть - сильное ВВ Осадок надо промыть водой (лучше дистилированой) аж кислотность будет 7 насыщеный р-р цианистого калия МЕДЛЕНО заливаем в промытый осадок и легонько, круговыми движениями посуды перемешиваем. Добавлять пока весь осадок не растворится. Получается маточный раствор Маточный раствор нагревай до 65С - нагревать до тех пор пока не перестанет вонять амиаком под вакумом сушим на 3/4 объема. Останавливаем процес, собираем осадок (остаток маточного р-ра можна еще раз использовать на следущий раствор) осадок досушиваем под вакумом в процесе создаете ВВ - поетому делать на ваш страх и риск. Вариант №2 - просто опасный травим золото в царской водке по надобности греем до 85С не более аж получится маточный раствор В маточный раствор запускаем сильную кислоту - цианистое золото выйдет в осадок. Замешиваем осадок в раствор цианистого калия. Будет много очень токсичных и вонючих паров - на свой страх и риск П.С. если вам надо для золочения, то просто купите уже готовый дицианоаурат. П.П.С. не спешите делать, тут есть химики по опытнее. Вот как Аркадий например вам советует
  21. Зависит от того какую соль. Но впринципе золотая стружка + кислота (в маленьких порциях). Вытяжка обязательно. Или же работай на улице, подальше от населения и с маской/противогазом. Вдыхать пары что-то вообще не улыбается. Еще рекомендую дождатся других коментов, может что-то поинтересней предложат
  22. никто ничего не закрывал - не выдумывайте. Мой знакомый врач как раз порадовался реформам, так как спец он хороший, клиентуры у него много. Теперь хоть зп более менее (27к грн), а не меньше чем на касе.
  23. Я в Польше закончил биотехнологию бакалавра в УМЦС (Люблин) - могу порекомендовать и универ и направление. Образование там достадочно неплохого уровня + биотех это очень универсальная специальность. Я например не знал что я хочу делать больше - медицину или пищпром, но на магистре уже определился и закончил с упором на тзв белую биотехнологию. Но много моих колег пошли по пути красной биотехнологии - сейчас или при больницах или на универе как pracownik wydziału
×
×
  • Создать...
Яндекс.Метрика