Определение pH питательной среды (Биохимия / Микробиология)

[amidigel11]

Делаю практику , значит стопорюсь я на этом вопросе Определение pH питательных сред

Нашел я в книге 1978 этот способ , 

Определение pH питательных сред. Реакция среды определяется концентрацией содержащихся в ней водородных и гидроксильных ионов. Преобладание ионов водорода обусловливает кислую реакцию , преобладание гидроксильных – щелочную, равенство из нейтральную – реакция среды . Опытным путем было установлено, что нейтральная реакция Соответствует концентрации гидроксильных и водородных ионов , равной 0,0000001. (H+)=(OH-)=0,0000001 г-ион/л Произведение контракции водородных и гидроксильных ионов равно константе: K=(H-7)x(OH-7)=10-14 Таким образом, значения Н+ и ОН- связаны с постоянной величиной произведения: изменение одной из них влечет за собой соответствующее увеличение или уменьшение другой. Вследствие этого для характеристики реакции среды достаточно определить в растворе содержание каких-либо одних ионов — водородных или гидроксильных. В настоящее время принято определять реакцию среды по содержанию в ней ионов водорода. .Концентрация водородных ионов, выраженная в г-ионах на | л, получила название водородного числа. В воде и биологических жидкостях водородное число представляет собой ничтожно малую величину, неудобную для практического использования. Поэтому для выражения концентрации водородных ионов в жидкости был введен водородный показатель, обозначаемый символом РН; рН представляет собой логарифм величины Н (абсолютной концентрации водородных ионов), взятый с обратным знаком. В принятом обозначении нейтральной реакции соответствует рН 7,0. Показатель ниже 7,0 (6,9—1,0) указывает на кислую реакцию раствора, выше 7,0 (7,1—14,0) — па щелочную реакцию. Определение рН раствора производят колориметрическим и электрометрическим способами. В микробиологических лабораториях преимущественное распространение получил первый из упомянутых способов. Определение рН среды колориметрическим способом. В основу колориметрического определения рН положена способность некоторых веществ, называемых ипдикаторами, изменять цвет или интенсивность окраски в зависимости от РН раствора. В связи с этим две жидкости с одинаковой толщиной слоя, содержащие один и тот же индикатор, могут иметь полное совпадение цвета только при равных значениях РН. Для колориметрического определения рН в растворе пользуются обычпо прибором Уольполя — Михаэлиса, представляющим собой компаратор и набор индикаторов.

Техника определения рН раствора колориметрическим способом. В фарфоровую палетку наливают 2—3 мл исследуемой жидкости, прибавляют 2—3 капли «универсального индикатора» и смешивают стеклянной палочкой; образующуюся при этом окраску сравнивают с цветной бумажной шкалой. рН определяют на основании полного совпадения цвета смеси исследуемого раствора и индикатора с одной из цветных полосок шкалы, под которой имеется соответствующее цифровое обозначение. Определив ориентировочно рН раствора, выбирают соответствующий иникатор Михаэлиса.

В стандартную пробирку наливают 2 мл исследуемой жидкости, 4 мл дистиллированной воды и 1 мл выбранного индикатора. Пробирку ставят во второе отверстие компаратора. Рядом с ней, справа и слева (отверстия 1 и 3), ставят пробирки, содержащие по 2 мл исследуемого раствора и 5 мл дистиллированной воды. В отверстие 5 помещают пробирку с 7 мл дистиллированной воды, а с обеих ее сторон, в отверстия 4 и 6, стандарты с тем же индикатором, который добавлен к исследуемой среде. Стандарты подбирают до тех пор, пока интенсивность их окраски и исследуемой жидкости не станет одинаковой. При исследовании растворов, окрашенных в желтый цвет, в компаратор вставляют светофильтр синего цвета. Жидкость при этом приобретает зеленый цвет, оттенки которого улавливаются значительно легче, чем желтого. При работе с мутной жидкостью вставляют матовый светофильтр, скрывающий мутность исследуемой среды. РН исследуемого ‘раствора будет соответствовать величие, указанной на этикетке стандарта, с цветом которого он полностью совпадает.

 

Мне говорят , что этот старый и щас так не делают. В новых книгах ничего об определение ph питальных сред не сказано. Помогите мне найти правильный способ....

[amidigel11]

Решено , нашел я способ.....

[dzetta]

С 1910г и по настоящее время лучшая среда для культивирования - плазма. Алхимики начинают и выигрывают