Протеины

[Sara.75]

Белок, собранный с помощью аффинной хроматографии, не проявляет активности, хотя с помощью анализа белка Брэдфорда он обнаруживается в высокой концентрации. Что лучше всего объясняет этот феномен?

 

A. Реагент Брэдфорда приготовлен неправильно.
Б. Активный центр занят свободным лигандом.
C. Белок связан с колонкой.
D. Белок не катализирует интересующую реакцию.

Можете,пожалуйста,привести мотивированный ответ со всеми необходимыми пояснениями.

[Angry_Biotechnologist]

Тема не туда поставлена, но я попробую ответить

 

А - реакция идет, значит реагент приготовлен нормально

Б - Очень возможно что выбраный лиганд просто заблокировал активный центр из-за чего правильный белок был изолирован, но он неактивный.

С - нет, мы же нашли фракцию белка

Д - возможно... наверное? Аффинная хроматография должна вытягивать именно интересующюю фракцию, этот метод имеет высокую специфичность, он не должен давать осечек (разве что сама колона была неправильно приготовлена). Посему скорее всего нет

 

Остается вариант Б - некий лиганд просто прицепился к активному центру и прeвратился в ингибитора (non competitive inhibitor)

Изменено 17 Декабря, 2021 в 08:39 пользователем Angry_Biotechnologist