Реакции биофлавоноидов

[Phenil]

Для качественного определения рутина (предсавилель класса флавонолов) используют реакцию с концентрированной серной кислотой. Для количественного определение рутина (витамина Р) в чае, используют метод пермангонатометрии. Помогите пожалуйста написать уранения протекающих реакций.

Формула рутина:

 

http://upload.wikimedia.org/wikipedia/comm...250px-Rutin.png

[Гость alkopnin]

Для качественного определения рутина (предсавилель класса флавонолов) используют реакцию с концентрированной серной кислотой. Для количественного определение рутина (витамина Р) в чае, используют метод пермангонатометрии. Помогите пожалуйста написать уранения протекающих реакций.

Формула рутина:

 

http://upload.wikimedia.org/wikipedia/comm...250px-Rutin.png

Качественная реакция с серной кислотой основана на отщеплении и окислении (обугливании) 2 сахарных остатков, содержащихся в молекуле рутина (рутин: это глюкозил-рамнозил-кверцетин). Так и пишите, образуется кверцетин или дигидрокверцетин, углекислый газ и вода

[Phenil]

Качественная реакция с серной кислотой основана на отщеплении и окислении (обугливании) 2 сахарных остатков, содержащихся в молекуле рутина (рутин: это глюкозил-рамнозил-кверцетин). Так и пишите, образуется кверцетин или дигидрокверцетин, углекислый газ и вода

Спасибо Вам. Как же быть с окислением рутина перманганатом калия? какой там химизм?

[Гость alkopnin]

Спасибо Вам. Как же быть с окислением рутина перманганатом калия? какой там химизм?

 

Ни в одной методике количественного определения в растениях не видел, чтоы рутин титровали перманганатом: его определяют методом УФ-спектрофотометрии.

Насколько мне вспоминается фармхимия, к раствору испытуемого вещества прибавляется раствор индигосульфокислоты в концентрированной серной кислоте, вся эта бяка разбавляется водой (получается синяя смесь) и титруется перманганатом до светло-желтой окраски. Химизм щас если найду напишу

Внизу я привел формулу: это индигокармин, в индигосульфокислоте нет ионов натрия, вместо них: водород

[Phenil]

Ни в одной методике количественного определения в растениях не видел, чтоы рутин титровали перманганатом: его определяют методом УФ-спектрофотометрии.

Вот методика, по которой я работаю. (Шапиро Д.К. Практикум по биологической химии, Мн.: «Вышэйшая школа», 1976. Стр. 97-99)

Определение суммарного количества Р-витаминных веществ в чае. В листьях растения витамин Р в основном представлен катехинами и их производными (чайным танином). В числе суммы катехинов чайного листа почти 9/10 составляют L-эпикатехин, эпикатехингаллат, эпигаллокатехин и эпигаллокатехингаллат.

В основу метода количественного определения вита¬мина Р в чае положена способность бесцветных катехи-нов окисляться марганцовокислым калием с образовани¬ем окрашенных соединений.

Реактивы и материалы: а) чай, черный или зеленый; б) марганцовокислый калий (перманганат ка¬лия), 0,1 н раствор: 3,16 г (навеска на аналитических ве¬сах) растворяют в прокипяченной и остуженной дистил-лированной воде в мерной колбе емкостью 1 л, раствор доводят до метки той же водой. Поправку на титр раство¬ра КМп04 устанавливают по химически чистому щавеле¬вокислому натрию или аммонию; в) раствор индигокармина: 1 г индигокармина растирают в фарфоровой ступ¬ке и растворяют в 50 мл концентрированной серной кис лоты. Раствор переносят в мерную колбу емкостью 1 л и доводят водой до метки, затем фильтруют через бу¬мажный складчатый фильтр. Хранят в холодном месте в склянке из темного стекла; срок годности раствора — не более 10 дней.

Навеску чая (0,5—0,6 г) переносят в коническую кол¬бу, заливают 200 мл кипящей воды, колбу закрывают пробкой с воздушным холодильником и продолжают ки¬пячение в течение 5 мин., после чего охлаждают. Изме¬ряют общий объем-водного экстракта.

В большую фарфоровую чашку наливают 500 мл ди¬стиллированной воды, 25 мл-раствора индигокармина и 10 мл водного экстракта из листьев чая (пипеткой). Рас¬твор в чашке, окрашенный в синий цвет, титруют 0,1 н раствором марганцовокислого калия до появления жел¬того окрашивания. Раствор марганцовокислого калия прибавляют небольшими порциями, все время перемеши¬вая жидкость в чашке стеклянной палочкой.

Одновременно проводят контрольный опыт: в чашку наливают 500 мл дистиллированной воды, 25 мл раство¬ра индигокармина и титруют 0,1 н раствором перман-ганата. Опытное и контрольное титрования повторяют 3—4 раза.

Суммарное содержание веществ Р-витаминного дейст¬вия в чае (в процентах) х вычисляют по формуле:

X = (a-B) K * 0.0064 V1*100/ dV2

где а — количество 0,1 н раствора КМп04, израсходо¬ванное на титрование опытного раствора, мл; b — то же для контрольного опыта; К — поправка на титр 0,1 н рас¬твора марганцовокислого калия; 0,0064 — количество чайного танина, окисляемое 1 мл 0,1 н раствора КМnО4, г; v1 — объем водного экстракта из листьев чая, мл; v2 — количество водного экстракта, взятое для титрования, мл; d — навеска.

quote]

[Гость alkopnin]

таким способом определяют как Вы правильно написали в составе чая-дубильные вещества, то есть конденсированные полифенолы,

эта методика устарела, сейчас уже давно действует ГФ11 и даже 12 издания (там расчет немного по-другому ведется), но это определение танинов, А вот если Вам необходимо определить рутин, то используют спектрофотометрию, щас дам картинки из ГФ, то, что дана методика количественного определения, это выдержка из Фармакопейной статьи "Трава Зверобоя" (Herba Hyperici)

[Phenil]

таким способом определяют как Вы правильно написали в составе чая-дубильные вещества, то есть конденсированные полифенолы,

эта методика устарела, сейчас уже давно действует ГФ11 и даже 12 издания (там расчет немного по-другому ведется), но это определение танинов, А вот если Вам необходимо определить рутин, то используют спектрофотометрию, щас дам картинки из ГФ, то, что дана методика количественного определения, это выдержка из Фармакопейной статьи "Трава Зверобоя" (Herba Hyperici)

[/Количественное определение суммы флавоноидов в сухих соцветиях пижмы обыкновенной [Ладыгина Е.Я. Химический анализ лекарстенных растений. -М.:Высш. школа, 1961]

Оборудование и материалы:

Бумага фильтровальная, аппарат Сокслета, плоскодонные колбы вместимостью 200 мл, колбы со шлифами вместимостью 100 мл, колбы мерные вместимостью 25 и 50 мл, градуированные пипетки вместимостью 1 и 20 мл, цилиндры мерные на 50 и 100 мл, воронка делительная на 50 мл, бюксы с притертыми крышками, весы лабораторные аналитические, установка для отгонки растворителей, шкаф сушильный лабораторный, спектрофотометр СФ – 4А.

Реактивы:

Этанол, метанол, хлороформ, тетрахлорметан, этилацетат.

Ход эксперимента:

1 г измельченных соцветий пижмы помещали в пакетик из фильтровальной бумаги и экстрагировали в колбе со вставленным обратным холодильником со шлифами хлороформом в течении 3 ч. Хлороформное извлечение отбрасывали, а пакетик с навеской высушивали и экстрагировали в круглодонной колбе с обратным холодильником на водяной бане 30 мл метанола в течении 3 ч, периодически перемешивая. Брали 20 мл извлечения и метанол отгоняли на роторе досуха. Сухой остаток растворяли в 20 мл дистиллированной воды, количественно переносили в делительную воронку вместимостью 50 мл и очищали дважды по 15 мл тетрахлорметаном.

Очищенный водный экстракт пятикратно обрабатывали по 20 мл этилацетата, дожидаясь каждый раз полного расслаивания фаз. Объединенный этилацетатный экстракт упаривали в вакууме досуха и сушили в течение 1 ч в сушильном шкафу при температуре 65 ˚С. Высушенный остаток растворяли в небольшом объеме этилового спирта и переносили количественно в мерную колбу на 25 мл, доводили объем до метки этиловым спиртом (раствор А), 0,5 мл раствора А перенесли в мерную колбу на 50 мл и объем довели этиловым спиртом до метки (раствор Б).

Определяли оптическую плотность раствора Б на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при λ = 300 нм.

Процентное содержание суммы флавоноидов х вычислили по формуле х = DK 100/Е 1 см m 100 l (1), где D – оптическая плотность исследуемого раствора; 25 – объем раствора А, мл; К – коэффициент разведения раствора А, равный 100; - удельный показатель поглощения, равный 560,8; m – навеска сырья в расчете на взятый аликвот, г; l – толщина слоя,0,005. Похажая попалась мне методика, по логике с Вашей. Может Вы втречались с другими методиками по количественному определению флавонолов - рутина и кверцетина?

quote]

[Гость alkopnin]

У цветков пижмы уже лет 15 как другая методика определения, куда попроще этой будет и в пересчете на лютеолин методом УФ-спектрофотометрии. Я с такими методиками встречаюсь каждый день в ГФ11 издания

Залезьте на www.nehudlit.ru, там в разделе медицина или химия (точно не помню) найдете электронные варианты ГФ11 издания, Вас должен интересовать 2 том (хотя оба пригодятся), там В Частных Фс Вы найдете все необходимые методики

P.S. Такая древность, как книжка Ладыгиной конечно, чрезвычайно интересна, но сейчас мало у кого она осталась, так как есть более современные методики