Пик 4-эпитетрациклина

[Chimik]

Существует такая проблема. При хроматографическом анализе тетрациклина расщепляется пик 4-эпитетрациклина. Причем воспроизводится методика британской фармакопеи. Пробовали растворять не в сантимолярной солянке, а в воде или в солянке с меньшей концентрацией - та же проблема. Если растворять в подвижной фазе - пик выходит хороший, однако такие растворы нестабильны и их использование при количественном анализе невозможно. Может проблема вся в колонке? Мы использовали Zorbax Eclipse Plus C18 и Purospher STAR RP 18e. Или все дело в подвижной фазе?

[chemist-sib]

Существует такая проблема. При хроматографическом анализе тетрациклина расщепляется пик 4-эпитетрациклина. Причем воспроизводится методика британской фармакопеи. Пробовали растворять не в сантимолярной солянке, а в воде или в солянке с меньшей концентрацией - та же проблема. Если растворять в подвижной фазе - пик выходит хороший, однако такие растворы нестабильны и их использование при количественном анализе невозможно. Может проблема вся в колонке? Мы использовали Zorbax Eclipse Plus C18 и Purospher STAR RP 18e. Или все дело в подвижной фазе?

Я так понимаю, что в качестве подвижной фазы вы используете изократику: какая-нибуь органика - водный буфер? А если попробовать следующий вариант: готовить пробу в мерной посуде на сантимолярной солянке но в концентрациях, раз в 10 больших, затем, ex tempore, дополнительно разбавлять кислую пробу элюентом - пипетками-дозаторами, аккуратненько, в те же 10 раз, в небольших объемах - и - быстренько-быстренько - в хроматограф... Так, чтобы и британской фармакопее не было обидно, и чтобы голова не болела за расщепленный пик?..

[Chimik]

Спасибо! Попробую!