Доксорубицин: определение концентрации в растворе фотометрическим методом

[praurima]

При построении калибровочного графика(КГ) возникает ряд вопросов:

1) если воспользоваться для построения прямой программой Origin 7.0 (аппроксимация зависимости по МНК), то на выходе получаем прямую, которая не проходит через начало координат. Вопрос: обязательно ли калибровочный график для доксорубицина должен проходить через начало координат?

2) какие концентрации (приблизительно) оптимально выбирать для построения КГ для доксорубицина ?

Возможно, я не слишком точно сформулировала вопросы: я новичок в этом вопросе.

[Wergilius]

При построении калибровочного графика(КГ) возникает ряд вопросов:

1) если воспользоваться для построения прямой программой Origin 7.0 (аппроксимация зависимости по МНК), то на выходе получаем прямую, которая не проходит через начало координат. Вопрос: обязательно ли калибровочный график для доксорубицина должен проходить через начало координат?

Если добавите точку (0,0), то будет. По-идее, при постановке методики у вас должен быть диапазон концентраций, для которого вы строите калибровку. И работать потом только в этом диапазоне. Включить ли нулевую точку зависит от вашего диапазона.

 

2) какие концентрации (приблизительно) оптимально выбирать для построения КГ для доксорубицина ?

Оптимально выбирать концентрации в том диапазоне, в кротом вы хотите потом его определять. Обязательно нужны точки в начале и конце диапазона.

Если у вас диапазон охватывает несколько порядков концентрации, то возможно придется разбивать на поддиапазоны в которых будет своя калибровка. Часто поддиапазоны выбирают так, чтобы отношение концентраций в начале и в конце поддиапазона были ~ 2,5 - 3, или, скажем, каждый порядок.

[chemist-sib]

Wergilius - боюсь, что интерес ТС к этому вопросу давно "простыл". Но если - для будущих поколений?.. Тогда - и мои "пять копеек": в зависимости от конкретной методики, фотометрический график вовсе не обязательно должен проходить через ноль. Простейший пример - сам реактив - окрашен и поглощает на аналитической длине волны, а в канале сравнения - не он, а просто - вода. Если одинаково поступать и при постронении градуировочного графиа, и при определении - точность будет ровно такая же, как если фотометрировать (опять же - одинаково) против полного контроля реактивов. Другой пример - когда аналит присутствует в реактивах - тогда тоже есть некий "нулевой" фон. Основное же правило - одинаково поступать и при градуировке, и при определении.