Вопрос по фосфатному буферу

[A_drenalin_e]

Добрый день, помогите,пожалуйста, разобраться с составом буфера.

Для определения дегидрогеназной активности из биообъектов согласно методике используют специальный фосфатный буфер(для разбавления,ресуспендирования объекта) следующего состава:

2% растворе K₂HPO₄, содержащем 0,1% желатина и 0,2% MgCl ₂

_{Вопрос -  Зачем к фосфатному буферу добавляют желатин и} MgCl _2????

[NLVN]

Желатин - хорошо известный стабилизатор коллоидных систем. Магний?... А фиг его знает, может для получения микрокристаллов, или пит среда пролонгированного действия, или одновременно металло буфер.

[tvv385]

Если это среда для посевов - то желатин для бактерий, а не для буфера...

[A_drenalin_e]

Если это среда для посевов - то желатин для бактерий, а не для буфера...

Нет,это буфер для фермента.  Грубо говоря, берут культуру бактерий, откручивают культуральную жидкость, ресуспендировают этим буфером, убивают бактерии, измеряют активность фермента ( внутренность бактерии,плавающие в этом буфере).

 

Вообще метода изначально писалась для измерения активности этого фермента (дегидрогеназы) из растительного сырья. Там получают экстракт из растения,добавляют буфер и меряют по методе активность.

 

Только вот зачем желатин с магнием туда впихнули хз

Желатин - хорошо известный стабилизатор коллоидных систем. Магний?... А фиг его знает, может для получения микрокристаллов, или пит среда пролонгированного действия, или одновременно металло буфер.

Зачем микрокристаллы ферменту????

По сути то получается

MgCl₂ + K₂HPO₄ = MgHPO₄ + 2 KCl

И тупо осадок

Зачем буферу осадок и желатин?(((((((((((((((((

[Дельта]

Так вроде в ходе определения активности дегидрогеназ наблюдают скорость обесцвечивания раствора,а в присутствии агара или желатина это происходит более наглядно,тк  время зафиксировать легко от начала и до конца реакции.

Магния хлорид-антикоагулянт.

[Bach]

Защита от неспецифичного связывания если в плашке делается

а магний ,вероятно, необходим для работы этих дегидрогеназ

Изменено 27 Декабря, 2014 в 12:29 пользователем Bach