Фенол-сернокислый метод на анализ сахаров

[Angry_Biotechnologist]

Добрый день,

Пытаюсь провести опыт на анализ лактозы модифицированым методом Дюбоиса (Dubois method). Первая попытка заключалась в следующем: 80% м\м фенол 20мкл + 0.4мл анализируемого р-ра (0.095г\л и менее) + 1.2мл 96% H2SO4. Вторая попытка: 1мл р-ра + 1мл 5% фенола + 5мл кислоты. Третяя попытка: 1мл р-ра + 5мл кислоты - нагрев до 90°С в течении часа + фенол.

Результаты очень странные - первый раз в пробирке получились все цвета радуги, разделенные на фазы (легко красный - оранжевый - филетовый  потом градация из фиолетового в голубой и зеленый)ю При смешивании фаз получался темный синий цвет или какой-то отенок зеленого. Второй раз - получилось тоже самое только на больший объем. Третий же раз - все растворы вышли синими.

 

для всех растворов используется деминерализованая вода.

Фенол - новая банка, открыта мной, но срок годности прошел в 2020.

Кислота - новая

Пробирки - епендорф или обычные стекляные.

Результаты - в общем и целом анализировать не возможно (все что удалось собрать показано в приложении). Те числа что видно на графике: отобраны из разных паралелей измерения так чтобы максимально подходить для создания кривой (одним словом - результаты ненадежны).

 

 

Пробирки с 3ей попытки синий цвет постепенно потеряли - через 1-2 дня его уже небыло в большинстве растворов.

 

Смешивание чистых кислоты и фенола дает яркий бирюзовый цвет. Фенол + кислота + вода - темный синий цвет. Добавление меньшего количества фенола иногда помагает - раствор становится легко оранжевым/желтым, но в основном получается зеленый раствор.

 

Спасибо за внимание,

[chemister2010]

Мое предположение - где-то в воду попало железо. Проверьте установку по очистке воды. 

[Angry_Biotechnologist]

14 часов назад, chemister2010 сказал:

Мое предположение - где-то в воду попало железо. Проверьте установку по очистке воды. 

У нас как раз начал очиститель протекать когда помпу включаеш. Проверим - я напишу результат сюда, спасибо за совет.

[avg]

Железо3 с фенолом сильное окрашивание по моему дает в не очень кислой среде.

[Angry_Biotechnologist]

Провел реакцию с роданидом амония на выпареной (на 3/4 объема) пробе воды - на нормальную желто-оранжевую окраску накладывается еле заметный легко красный оттенок. Думаю можно пробу считать позитивной.

 

7 часов назад, avg сказал:

Железо3 с фенолом сильное окрашивание по моему дает в не очень кислой среде.

Может катализирует что-то? В интернетах нашел информацию что фиолетовый цвет в такой реакции - результат вхождения в процес нафталена. Тоесть разных субстанций там много сделалось.