Пробоподготовка спиртовых растительных экстрактов для ГХ-МС

[Eridu]

Здравствуйте Уважаемые Участники форума,  мне хотелось бы узнать как провести подготовку пробы спиртового экстракта цветков ивы ( экстракция 40% водным раствором этанола; метод экстракции-мацерация) для исследования методом ГХ-МС ( газовая хроматомасс-спектрометрия)? Цель исследования - определение количественного содержания в экстракте эстриола. Может быть кто-нибудь из Вас имел опыт подобного исследования?

[chemist-sib]

Для качественного исследования я бы высушил аликвоту спиртового экстракта в токе теплого воздуха, перерастворил бы сухой остаток в необходимом объеме этилацетата, при необходимости (муть) - дополнительно отцентрифугировал и вот это - воткнул бы в ГХ-МС. А для количественного определения - стандарт эстриола имеется? И как собирались количку делать? Методом добавки? С внутренним стандартом по графику? С учетом выхода из исходного растительного сырья? Или - только в конечном экстракте? Конкретную схему определения можно будет прикинуть только после решения всех этих (и им подобных) вопросов.

[Eridu]

Для качественного исследования я бы высушил аликвоту спиртового экстракта в токе теплого воздуха, перерастворил бы сухой остаток в необходимом объеме этилацетата, при необходимости (муть) - дополнительно отцентрифугировал и вот это - воткнул бы в ГХ-МС. А для количественного определения - стандарт эстриола имеется? И как собирались количку делать? Методом добавки? С внутренним стандартом по графику? С учетом выхода из исходного растительного сырья? Или - только в конечном экстракте? Конкретную схему определения можно будет прикинуть только после решения всех этих (и им подобных) вопросов

 

Большое спасибо за Ваш ответ. Стандарт эстриола- если только выделить из аптечного  крема "Овестин,". Задача исследования- определение концентрации эстриола именно в полученном экстракте. Усложняет анализ еще то, что неизвестно содержится ли эстриол в полученном экстракте в виде агликона или гликозида.

[Тот Самый 1]

Здравствуйте Уважаемые Участники форума,  мне хотелось бы узнать как провести подготовку пробы спиртового экстракта цветков ивы ( экстракция 40% водным раствором этанола; метод экстракции-мацерация) для исследования методом ГХ-МС ( газовая хроматомасс-спектрометрия)? Цель исследования - определение количественного содержания в экстракте эстриола. Может быть кто-нибудь из Вас имел опыт подобного исследования?

Тот учит так. Отогнать из экстракта спирт на роторном испарителе, переэкстарагировать в ДХМ. ДХМ просушить над MgSO_4, фитьтровать и можно колоть в ГХ/МС.

[chemist-sib]

Да... С количественным определением - при наличии только такой "отправной точки" по концентрации, похоже, будут муки мучные... И методические, и технологические... То, что форма нахождения аналита - неизвестна, еще вполне можно разрешить - предварительный гидролиз Вам - "в руки". И как-то мне не очень по душе идея колоть в прибор хлорорганику: я, все же, предпочитаю "старорежимный" этилацетат...

[Eridu]

Да... С количественным определением - при наличии только такой "отправной точки" по концентрации, похоже, будут муки мучные... И методические, и технологические... То, что форма нахождения аналита - неизвестна, еще вполне можно разрешить - предварительный гидролиз Вам - "в руки". И как-то мне не очень по душе идея колоть в прибор хлорорганику: я, все же, предпочитаю "старорежимный" этилацетат...

Большое спасибо за Ваши ответы. Хотелось бы еще кое-что уточнить. А если имеется еще и масляный экстракт цветков ивы ( мацерация рафинированным оливковым маслом), то можно ли сделать анализ такой пробы методом ГХ-МС ( с целью определения количественного содержания эстриола) ?

[chemist-sib]

Обычно стараются такое "г...но" в прибор не толкать, от липидов, по возможности, избавляются на стадиях пробоподготовки (типо, распределения в несмешивающейся системе гексан-ацетонитрил, с последующим реконструированием ацетонитрильной фазы в этилацетат - но не факт, что Ваш аналит не "предпочтет" липофильную фазу), но... почему бы и нет?.. Растворите в этилацетате и кольните. Ну, чуть быстрее лайнер засрется и колонку придется подрезать... Так это и после "чистых" проб, в конце-концов, приходится иногда делать. Основная проблема-то - та же самая - стандарт: с каким количеством сравнивать?..

ЗЫ: загляните-ка, еще со своей проблемой на anchem.ru - там все-таки профессионалы-аналитики обретаются. Советы от них, скорее всего, будут более мудрыми.

Изменено 14 Октября, 2017 в 11:56 пользователем chemist-sib

[Eridu]

Обычно стараются такое "г...но" в прибор не толкать, от липидов, по возможности, избавляются на стадиях пробоподготовки (типо, распределения в несмешивающейся системе гексан-ацетонитрил, с последующим реконструированием ацетонитрильной фазы в этилацетат - но не факт, что Ваш аналит не "предпочтет" липофильную фазу), но... почему бы и нет?.. Растворите в этилацетате и кольните. Ну, чуть быстрее лайнер засрется и колонку придется подрезать... Так это и после "чистых" проб, в конце-концов, приходится иногда делать. Основная проблема-то - та же самая - стандарт: с каким количеством сравнивать?..

ЗЫ: загляните-ка, еще со своей проблемой на anchem.ru - там все-таки профессионалы-аналитики обретаются. Советы от них, скорее всего, будут более мудрыми.

Большое спасибо за Ваш ответ. Возникает еще одно затруднение- если избавляться от липидов, то вместе с ними может уйти и эстриол ( он тоже относится к липидам). Относительно стандарта- любой стандарт содержит лишь сам эстриол, тогда как растительный экстракт( причем в значительном количестве, по сравнению с растительным экстрактом, который может содержать < 0,1% искомого соединения), содержит множество других трудноудаляемых балластных соединений, присутствие которых сильно сказывается при снятии спектра.

[chemist-sib]

...множество других трудноудаляемых балластных соединений, присутствие которых сильно сказывается при снятии спектра.

Но только не масс-спектра, тем более - на характеристических ионах, да после эффективного разделения на капиллярной колонке. Вы ж - не ИК- или УФ-спектр через массивный образец собираетесь снимать! А чтобы не заморачиваться с дополнительными возможными потерями, как и посоветовали на anchem`e, просто - разбавляете свой образец и вкалываете его. Успехов! 

[Graffin]

Доброго дня!

Коллеги,я не стал создавать новую тему, так как вопрос схожий.

я исследую влияние режимов работы ректификации на содержание примесей в спирте на лабораторной установке. Продукт пищевой этанол. Хроматограф дал незначительные изменения в сравнении опытов с контролем. Сейчас работаю с микропримесями, но для их определения нужен газовый хроматограф типа НР 5890А с масс-селективным детектором НР 5972А (или аналог) и система обработки даных НР ChemStation, содержащей библиотеку масс-спектров...чего соответственно нет...

Нужно буквально пару тройку проб сравнить с контролем, для начала... Если ли кто владеет методикой и оборудованием? Желательно Московская область или Москва. Пожалуйста откликнитесь...

Изменено 18 Октября, 2017 в 13:28 пользователем Graffin